直腸檢查即手臂通過直腸，隔著腸壁觸摸卵巢上卵泡的大小及彈性情況，掌握卵泡發育情況以確定適宜的配種期，這是鑒定母驢發情的最可靠方法。檢查前，首先應安全保定好母驢，并用無刺激的消毒藥劑洗刷驢外陰部，再用煮沸的溫水沖洗干凈。術者剪短并磨光指甲，洗凈手臂并涂上潤滑劑如植物油、榆樹皮浸泡的黏液或肥皂水，五指并攏成錐形，輕輕插人直腸內，手指擴張，以便空氣進入直腸，引起直腸努責，將糞排出。術者手指繼續伸入，當發現母驢努責時，應暫緩，直至狡窄部，以四指進入狹窄部，拇指在外，此時可采用兩種檢查方法：
        ①下滑法，手進入狹窄部，四指向上翻，在第3、第4腰椎處摸到卵巢韌帶，隨韌帶向下捋，就可摸到卵巢。由卵巢向下就可摸到子宮角、子宮體。
        ②托底法，右手進入直腸狹窄部，四指向前下摸，就可以摸到子宮底部，順子宮底向左上方移動，便可摸到子宮角。到子宮角上部，輕輕向后拉就可摸到左側卵巢。
        通過直腸和骨盆腔摸子宮的手式見，根據觸摸卵巢，可以判斷卵泡的發育情況。一般卵泡的發育可分為7個時期：
        

　　(l)卵泡發育初期兩側卵巢中開始有一側卵巢出現卵泡，初期體積小，觸之形如硬球，突出于卵巢表面，彈性強，無波動，排卵窩深。此期一般持續時間為1-3天，不配種。

　　(2)卵泡發育期卵泡發育增大， 呈球形，卵泡液繼續增多。卵泡柔軟而有彈性，以手指觸摸有微小的波動感。排卵窩由深變淺。此期持續1- 3天，一般不配種。

　　(3)卵泡生長期卵泡繼續增大，觸摸柔軟，彈性增強，波動明顯，卵泡壁較前期變薄，排卵窩較平。此期一般持續1-2天，可酌情配種(卵泡發育快的驢配種；反之，則不配)。

　　(4)卵泡成熟期此時卵泡體積發育到最大程度。卵泡壁甚薄而緊張，有明顯的波動感，排卵窩淺。此期可持續1-l.5天。應進行交配或輸精。

　　(5)排卵期卵泡壁緊張，彈性減弱，卵泡壁非常薄，有一觸即破的感覺。觸摸時，部分母驢有不安和回頭看腹部的表現。此期一般持續2-8小時。有時在觸摸的瞬間卵泡破裂，卵子排出。直檢時則可明顯摸到排卵凹及卵泡膜。此期宜立即配種或輸精。

　　(6)黃體形成期卵巢體積顯著縮小，在卵泡破裂的地方形成黃體。黃體初期扁平，呈球形，稍硬。因其周圍有滲出血液的凝塊，故觸摸有肉樣實體感覺。此時不應配種。

　　(7)休情期卵巢上無卵泡發育，卵巢表面光滑，排卵窩深而明顯。

　　以上各期的劃分是人為規定的，實際上卵泡各期的變化是緊密相連的，無嚴格的順序界限，只有熟練掌握才能做出確切判斷。

　　群眾實踐經驗是：三期酌配，四期必配，五期補配(指剛排卵的母驢配種)，這對提高驢的受胎率效果良好。